
PRM可對(duì)?標(biāo)蛋?質(zhì)、?標(biāo)肽段(如發(fā)?翻譯后修飾的肽段)進(jìn)?選擇性檢測(cè),從而實(shí)現(xiàn)對(duì)?標(biāo)蛋?質(zhì)/肽段的靶向驗(yàn)證和相對(duì)或絕對(duì)定量。?于?篩之后的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。

PRM技術(shù)是在多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(multiple reaction monitoring, MRM)技術(shù)的基礎(chǔ)上演化而來(lái)的 。 它基于?分辨 、?精度質(zhì)譜(如Orbitrap系列),?先利?四級(jí)桿質(zhì)量分析器的選擇檢測(cè)能力 ,在 一級(jí)質(zhì)譜中選擇性地檢測(cè)?標(biāo)肽段的?離?信息; 隨后在collision cell中對(duì)?離?進(jìn)?碎裂; 最后利?高分辨 、?質(zhì)量精度分析器在?級(jí)質(zhì)譜中檢測(cè)所選擇的?離?窗?內(nèi)的所有碎?的信息。

兩者都可?于差異較?的樣本(不同物種、不同組織部位),“有無(wú)”蛋白比較,不需要同位素標(biāo)記,成本相對(duì)低;樣本不受限制,應(yīng)?范圍?;
LFQ確定是數(shù)據(jù)重復(fù)性稍差,缺失值較多;
全息掃描DIA的重現(xiàn)性較高,所有離?信息都能采集,缺點(diǎn)是需要預(yù)先建?數(shù)據(jù)庫(kù),數(shù)據(jù)分析較LFQ復(fù)雜。

DIA是全息掃描模式,能全?記錄樣本信息,定量準(zhǔn)確性大大提高,重復(fù)性好,缺失值少,樣本采集時(shí)加?了保留時(shí)間校正同位素肽段,適合?樣本量,上機(jī)時(shí)間間隔可以較大,數(shù)據(jù)可回溯???于不同因素影響下的差異蛋?篩選,不同組織蛋?表圖譜繪制,疾病分型等等。

DIA技術(shù)是相較于傳統(tǒng)DDA技術(shù)而?的,傳統(tǒng)的DDA技術(shù)依賴于?級(jí)母離子的峰強(qiáng)度,選擇信號(hào)排名在前?位的另外,DIA技術(shù)將質(zhì)譜整個(gè)全掃描范圍分為若?個(gè)窗口,對(duì)每個(gè)窗口中的所有離子進(jìn)?選擇、碎裂、檢測(cè),從而無(wú)遺漏、無(wú)差異地獲得樣本中所有離子的全部碎片信息。

雖然DIA定量能力出色,但畢竟是非靶技術(shù),結(jié)果最終還需要進(jìn)?靶向驗(yàn)證。但DIA的?準(zhǔn)確性,能夠使后續(xù)靶向驗(yàn)證的銜接性、?致性更高。從某種程度上來(lái)說(shuō),DIA實(shí)現(xiàn)了篩選與初步驗(yàn)證的合?為?。

DIA定量原理與靶向技術(shù)相似,都是采?二級(jí)碎片離子進(jìn)行定量。
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